Pribolab - IAC-V500-3-25PriboFast®肝素（乳铁蛋白）免疫亲和柱-3ML-25T-91311

一、产品用途：

本产品可选择性吸附样品提取液中的乳铁蛋白 ，从而实现对目标物的特异性纯化。过柱纯化后的样品液杂质显著减少 ，可用于不同分析方法的测定。

二、概述：

乳铁蛋白（Lactoferrin，简称 LF）是一种天然存在于哺乳动物乳汁（尤其是初乳）、唾液、泪液等外分泌液中的多功能糖蛋白 ，也是哺乳动物免疫系统的重要组成部分。它不仅可作为衡量乳品（特别是初乳与高端配方奶粉）营养与功能价值的关键指标 ，也是食品、医药及化妆品领域中广泛使用的重要功能性原料。因此 ，准确检测其含量 ，对于保障产品质量与安全性具有重要意义。

三、反应原理：

本产品的检测基于亲和层析原理。柱内凝胶上固定有肝素 ，样品中的乳铁蛋白经提取、过滤和稀释后 ，缓慢通过亲和柱。在此过程中 ，乳铁蛋白与肝素发生特异性结合 ，随后通过洗涤步骤去除未结合的杂质。最后 ，使用洗脱液将目标蛋白解离 ，收集洗脱液即可用于分析仪器检测。

四、产品组成：

包括肝素（乳铁蛋白）亲和柱、产品说明书及 COA。

五、产品参数：

1、性能参数

六、需要但未提供的材料：

设备：HPLC、泵流操作架、高速均质器、高速粉碎机、单道微量移液器；

器皿耗材：量筒、漏斗、收集瓶、容量瓶、定量滤纸、玻璃纤维滤纸、离心管；

试剂：十二水合磷酸氢二钠、氯化钠、磷酸、蒸馏水、标准品。

七、试剂配制：

1、磷酸盐缓冲液：

28.4 g Na2HPO4·12H2O（或 11.26 g Na2HPO4），加 750 mL蒸馏水溶解 ，用磷酸调节 pH 至 7.0±0.1 ，加水定容至 1 L，混匀。

2、洗脱液

7.1 g Na2HPO4·12H2O（或 2.81 g Na2HPO4）+58.0 g NaCl，加 750 mL 蒸馏水溶解 ，用磷酸调节 pH 至 7.0±0.1 ，加水定容至 1 L ，混匀。

八、样品处理：

样品分析的最大误差来源是样品的收集和取样过程，所以要保证样品收集和取样的代表性。肝素亲和柱的柱容量（最大吸附乳铁蛋白）大于 2 mg，当样品中乳铁蛋白超出测定范围时 ，请适当减小称样量 ，使其在检测范围内 ，计算出准确含量。

（一）液体奶样品

1、称样 ：称取 5 g 样品（根据需要的检测范围确定称量多少） ，置于 50 mL 离心管中；

2、稀释 ：将 10 mL 磷酸盐缓冲液加入到离心管中 ，涡旋提取 3 min ，过玻璃纤维滤纸净化 ，备用；

（二）固体样品：（婴幼儿配方奶粉、乳粉等）

1、称样 ：称取 5 g（精确至 0.01 g）试样 ，置于 50 mL 离心管中；

2、稀释：将 25 mL 已预热到 40℃的磷酸盐缓冲液加入到样品中 ，完全溶解后，涡旋提取 3 min ，过玻璃纤维滤纸净化，备用；

九、操作程序：

使用前将低温下保存的亲和柱恢复至室温。

1、连接 ：用 30 mL 注射器筒下端插穿免疫亲和柱上盖中间圆孔 ，使其连通 ，取下柱帽 ，将柱管内的保护液放至近干（未完全流干） ，开始上样。

2、上样：准确移取 10.0 mL 上述样液移至注射器内；

3、富集：将空气压力泵与注射器连接 ，调节压力使样品提取液缓慢通过亲和柱 ，流速大约 2 秒 1 滴 ，直至样品全部通过亲和柱 ，建议重力过柱；

4、洗涤 ：用 10 mL 磷酸盐缓冲液分两次加压清洗 ，适当给一些压力 ，控制流速以 2-3 mL/min（1~2 滴/秒） ，直至液体全部通过亲和柱 ，并排干淋洗液；

5、洗脱：精密加入 2.5 mL 洗脱液洗脱亲和柱 ，在重力作用下或泵压作用下 ，缓慢通过亲和柱 ，控制流速以 1 mL/min （1~2 滴/2 秒），直至液体全部通过亲和柱，并排干洗脱液,收集全部洗脱液 ，涡旋混匀 30 s ，待 HPLC 检测。

十、注意事项

1、上柱液 pH 要在 6~8 之间，若偏离此范围需用盐酸或氢氧化钠调节 pH；

2、若样品浓度超出柱容量 ，需减少上柱量重新检测；

3、根据实际情况可以适当增减称样量 ，同时提取液体积需按比例进行调整；

4、使用前将低温下保存的亲和柱恢复至室温；

5、亲和柱需储存在 2-8℃条件下 ，不可冻存或常温保存；

十一、产品信息：

公司可提供的真菌毒素检测产品